*Transformation(BBa_E0240, <nowiki>#</nowiki>3, B0015, <nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>10, ,J31000, ,J44000)

*Picking up colony(<nowiki>#</nowiki>3, B0015, B0040,<nowiki>#</nowiki>9, J31000, J44000)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>5)

*Dissolution(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, K16500, <nowiki>#</nowiki>24)

*Making frozen stock(<nowiki>#</nowiki>3, B0015, B0040, <nowiki>#</nowiki>9, J31000, J44000)

*Passafe culture(<nowiki>#</nowiki>9, J31000)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>9, J31000)

*Defrost and transformation(BBa_E0030, E0020, <nowiki>#</nowiki>14, I712052,<nowiki>#</nowiki>17）

*Miniprep(BBa_E0030, E0020, <nowiki>#</nowiki>14, I712052, <nowiki>#</nowiki>17)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>5)

*Picking up colony(Ba_J23119, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>24, <nowiki>#</nowiki>10)

*Digest（BBa_E0240, <nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>5）

*Defrost（BBa_E1010, K325101, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>21, <nowiki>#</nowiki>22, <nowiki>#</nowiki>23）

*Transformation（BBa_K145001, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>21, <nowiki>#</nowiki>22）

*Miniprep(BBa_J23119, <nowiki>#</nowiki>2,  <nowiki>#</nowiki>10, <nowiki>#</nowiki>24)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>9 <nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17)

*Transformation(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>11, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>21, K325101, <nowiki>#</nowiki>22, <nowiki>#</nowiki>23)

*Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>1(18A), <nowiki>#</nowiki>20(6G), <nowiki>#</nowiki>21(2O), <nowiki>#</nowiki>14(6N), <nowiki>#</nowiki>23(2F))

*Picking up colony(<nowiki>#</nowiki>11)

*Gel extraction(B<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>5)

*Digest (<nowiki>#</nowiki>2 SPcut)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>11,  <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>21, <nowiki>#</nowiki>22, <nowiki>#</nowiki>23)

*Electrophoresis(<nowiki>#</nowiki>2)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>5)

*Passafe(<nowiki>#</nowiki>11)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>14-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>17-<nowiki>#</nowiki>5)

*Transformation(<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>14-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>17-<nowiki>#</nowiki>5)

*Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>11)

*Transformation (<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>2-3, <nowiki>#</nowiki>2-9, <nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>17-5, <nowiki>#</nowiki>11, <nowiki>#</nowiki>20)

**SPcut : <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>2-3

**XPcut : <nowiki>#</nowiki>10, <nowiki>#</nowiki>11, <nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>17-5

*Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>2-3, <nowiki>#</nowiki>2-9, <nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>17-5）

*Electrophoresis(<nowiki>#</nowiki>20_SP, <nowiki>#</nowiki>2-3_SP, <nowiki>#</nowiki>10_XP, <nowiki>#</nowiki>11_XP, <nowiki>#</nowiki>14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>17-5_XP）

**SPcut : <nowiki>#</nowiki>20

**XPcut : <nowiki>#</nowiki>10, <nowiki>#</nowiki>11, <nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>17-5

*Transformation(<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, product of Miniprep 07/20)

*Colony check(<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>2-9)

*Gel Extraction(<nowiki>#</nowiki>20_SP, <nowiki>#</nowiki>10_XP, <nowiki>#</nowiki>11_XP, <nowiki>#</nowiki>14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>17-5_XP)

*Ligation and Transformation(<nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>11, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>17-5)

*Picking up colony and making master plate(<nowiki>#</nowiki>20-9, <nowiki>#</nowiki>3-11, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-17-5)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>20-9, <nowiki>#</nowiki>3-11, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-17-5)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>14-5 XPcut,Ecut, <nowiki>#</nowiki>22 SPcut, <nowiki>#</nowiki>23 XPcut)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5(Re), <nowiki>#</nowiki>3(Negative control))

*Transformation(<nowiki>#</nowiki>15, <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>30, <nowiki>#</nowiki>3-14-5(Re), <nowiki>#</nowiki>3(Negative control))

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>10, <nowiki>#</nowiki>22, <nowiki>#</nowiki>24, <nowiki>#</nowiki>20-9, <nowiki>#</nowiki>3-11, <nowiki>#</nowiki>3-17-5)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>22_SP, <nowiki>#</nowiki>23_XP)

**SPcut : <nowiki>#</nowiki>1,<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>24

**EScut : <nowiki>#</nowiki>3-11

**XPcut : <nowiki>#</nowiki>3-17-5

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>1_SP, <nowiki>#</nowiki>2_SP, <nowiki>#</nowiki>3_SP, <nowiki>#</nowiki>24_SP, <nowiki>#</nowiki>3-11_ES, <nowiki>#</nowiki>3-17-5_XP, lexA, cheZ PCR product）

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>30)

*Nanodrop(<nowiki>#</nowiki>3-11(1), <nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>24, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>3-17-5(4)M<nowiki>#</nowiki>30)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>3 SPcut, <nowiki>#</nowiki>5 EXcut, <nowiki>#</nowiki>9 XPcut, <nowiki>#</nowiki>30 XP cut)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>30, pSB1A2)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-11-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>22-<nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>30)

*Transformation(<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-11-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>22-<nowiki>#</nowiki>9, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>30, <nowiki>#</nowiki>27(IPTG), <nowiki>#</nowiki>28)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-11-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>22-<nowiki>#</nowiki>9)

*Cloning(PCR)(<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28)

*PCR_2nd(lexA, cheZ, <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28)

*Digest (<nowiki>#</nowiki>30 again)

*Electrophoresis(product of ligation <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5(2), <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1,2), <nowiki>#</nowiki>14-5(2), <nowiki>#</nowiki>22-9(1,2,3))

*Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5(2), <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1,2), <nowiki>#</nowiki>14-5(2), <nowiki>#</nowiki>22-9(1,2))

*Digest(<nowiki>#</nowiki>23 XPcut)

*IPTG induct(<nowiki>#</nowiki>20-9)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>14-5(2) XPcut, <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1) XPcut)

*Cloning(PCR)(<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, lexA, cheZ)

*Defrost Frozen stock, Miniprep, Nanodrop and Electrophoresis(<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>30)

**XPcut : <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, cheZ, lexA, <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>23,<nowiki>#</nowiki>30

**EScut : <nowiki>#</nowiki>6

**EXcut : <nowiki>#</nowiki>7

**SPcut : <nowiki>#</nowiki>7,<nowiki>#</nowiki>20

*Defrost Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14-5(2), <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1))

*Miniprep, Electrophoresis and Digest(<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14-5(2), <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1))

*Gel extraction and Nanodrop(<nowiki>#</nowiki>6, <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>8, cheZ, lexA③, <nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>7_EX, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>7_SP)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>27-psB1A2, <nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>20-28, <nowiki>#</nowiki>28-psB1A2, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>29-psB1A2, <nowiki>#</nowiki>31-psB1A2, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>1-<nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>24-<nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>30)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>27-pSB1A2, <nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>20-28, <nowiki>#</nowiki>28-psB1A2, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>29-psB1A2, <nowiki>#</nowiki>31-pSB1A2, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>23, <nowiki>#</nowiki>1-<nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>24-<nowiki>#</nowiki>3-11-5(1), <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>30）)

**EScut : <nowiki>#</nowiki>6

**EXcut : <nowiki>#</nowiki>7

**SPcut : <nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>7, <nowiki>#</nowiki>20

**XPcut : <nowiki>#</nowiki>23

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>30, <nowiki>#</nowiki>14-5(insert,vector), <nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-11-5, cheZ, lexA)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>20-28, <nowiki>#</nowiki>31, <nowiki>#</nowiki>24-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>3-30)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>3-14-5(2), <nowiki>#</nowiki>6-5, <nowiki>#</nowiki>3-23)

**8/11 PCR product：<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28

**Miniprep product：<nowiki>#</nowiki>3-14-5(2), <nowiki>#</nowiki>5

*Digest（<nowiki>#</nowiki>5 EXcut, <nowiki>#</nowiki>14 EScut）

**8/11 digest product : <nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>3-30, cheZ, lexA

**8/11 PCR product : <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28

*Colony PCR (re) (<nowiki>#</nowiki>13-14-5)

*Miniprep(ligation product : <nowiki>#</nowiki>6-5, <nowiki>#</nowiki>3-23)

**XPcut:<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>6-5

**EScut: sulAp, uvrAp, <nowiki>#</nowiki>3-23

*Gel extraction(from previous digest products(8/12) : <nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>33, <nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>4, <nowiki>#</nowiki>3-23)

**EScut: <nowiki>#</nowiki>3-11-5 (to obtain pSB1AK3 EScut)

*Gel extraction(from digest products XPcut: cheZ, uvrBp(PCR products) EScut: <nowiki>#</nowiki>3-11-5 to obtain pSB1AK3 EScut)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>24-<nowiki>#</nowiki>3-17-5, <nowiki>#</nowiki>24-<nowiki>#</nowiki>3-11-5, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>29, <nowiki>#</nowiki>3-23-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>33-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>34--pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>35--pSB1AK3)

*Transformation(ligation products:WT, <nowiki>#</nowiki>2-9:cheZ-, <nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17) -> 37 incubation

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>24-<nowiki>#</nowiki>3-17-5, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>29, <nowiki>#</nowiki>3-23-<nowiki>#</nowiki>5)

*Culture (<nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17, <nowiki>#</nowiki>2-9, <nowiki>#</nowiki>2-4, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2)

*Incubation (<nowiki>#</nowiki>24-<nowiki>#</nowiki>3-11-5, <nowiki>#</nowiki>33-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3)

*Digest(SPcut: <nowiki>#</nowiki>3, Ecut:<nowiki>#</nowiki>3(control)) go to 37 incubation

*Ligation retry(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>29, Negative control :<nowiki>#</nowiki>3)

*Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17)

*Culture test(<nowiki>#</nowiki>14 on 0.3%Agar.(km))

*Miniprep(Ligation products : <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>17, <nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2)

*Waking from frozen stock(<nowiki>#</nowiki>3, CheZ-, WT)

*Culture from master-plate(<nowiki>#</nowiki>6-5, <nowiki>#</nowiki>20-28, <nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>33, <nowiki>#</nowiki>24-3-11-5 <nowiki>#</nowiki>24-3-17-5) -> Miniprep

*Gel extraction(SPcut:<nowiki>#</nowiki>3)

*Culture from Frozen stock(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>6-5, <nowiki>#</nowiki>20-28, <nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>33, <nowiki>#</nowiki>24-3-11-5 <nowiki>#</nowiki>24-3-17-5)

*Digest(8/17<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>33 SPcut, <nowiki>#</nowiki>14-5 XPcut, <nowiki>#</nowiki>33 Ecut, <nowiki>#</nowiki>3-27,<nowiki>#</nowiki>3-30,<nowiki>#</nowiki>20-28 EScut, pSB1K3 EPcut)

*Culture from 0809 master-plate ⑪ (<nowiki>#</nowiki>2-3-11-5) → Miniprep.

*Gel extraction(8/17<nowiki>#</nowiki>3_SP,<nowiki>#</nowiki>33_SP, <nowiki>#</nowiki>14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>33_E, <nowiki>#</nowiki>3-27_ES, pSB1K3 _EP)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>1,<nowiki>#</nowiki>2 SPcut, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5 XPcut, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5 SPcut(check), EPcut(selection), <nowiki>#</nowiki>3-30, <nowiki>#</nowiki>20-28 EScut, 0817 Gel extracted PCR product (uvrBp) EScut, 0818PCR products (uvrAp, uvrBp, cheZ) ES&XPcut)

*Ligation (8/17<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, 8/17<nowiki>#</nowiki>3-8/15<nowiki>#</nowiki>29, <nowiki>#</nowiki>33-<nowiki>#</nowiki>3-11-5, 8/15<nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-27-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>20-28-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>28-pSB1AK3)

*ColonyPCR(from ligation products)(<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-27-5)

*Gel extraction(08/18's digest products:<nowiki>#</nowiki>1_SP, <nowiki>#</nowiki>2_SP, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5_SP, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_XP, cheZ_XP, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5_EP, 8/18uvrBp_ES, 8/17uvrBp_ES, uvrAp_ES)

*Colony PCR retry(<nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3)

*Electrophoresis(<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>3-30, <nowiki>#</nowiki>6-5, <nowiki>#</nowiki>7, <nowiki>#</nowiki>20-28, <nowiki>#</nowiki>24-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>24-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>33)

**From frozen stock(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>7, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5(2), <nowiki>#</nowiki>3-30)

**From master plate(<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-27-5)

**From frozen stock(<nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5(2), <nowiki>#</nowiki>3-30) <nowiki>#</nowiki>7 was a little bit weak

**From ligation products(<nowiki>#</nowiki>7, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-5, <nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5)

**From Frozen Stock (<nowiki>#</nowiki>7_EX, <nowiki>#</nowiki>30_XP, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-30_ES)

**From Master plate(<nowiki>#</nowiki>3-14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3_SP, <nowiki>#</nowiki>3-27-5_XP)

*Sulvage <nowiki>#</nowiki>33 using protocol of transformation  

**From Master plate(<nowiki>#</nowiki>24-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>14-5), 700ul, in eppendolf tube

**from O.N. digest products(<nowiki>#</nowiki>7_EX, <nowiki>#</nowiki>30_XP, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-30_ES, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3_SP, <nowiki>#</nowiki>3-27-5_XP)

**From O.N. culture in eppendolf tube 700ul(<nowiki>#</nowiki>24-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>14-5)

**From O.N. culture(for Miniprep)(<nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>3-27-5, <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5)

**retry from master plate <nowiki>#</nowiki>3-14-5(278.1 ng/ul), <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5(188.9ng/ul), <nowiki>#</nowiki>34-pSB1AK3(89.6ng/ul), <nowiki>#</nowiki>3-27-5(327.0 ng/ul) O.N. culture

*Digest (<nowiki>#</nowiki>14-5 XPcut, <nowiki>#</nowiki>3-27-5 Xcut, Pcut (check), <nowiki>#</nowiki>3-27-5 EScut (sulvage) )

*Ligation (<nowiki>#</nowiki>14-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-30-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>30, <nowiki>#</nowiki>34-<nowiki>#</nowiki>3-11-5 <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28)

*<nowiki>#</nowiki>33 sulvage (isolation culture)

*Gel extraction & Electrophoresis(<nowiki>#</nowiki>3-27-5_ES, <nowiki>#</nowiki>14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-27-5_X, *PCR for amplification (or cloning) -> PCR clean-up system -> digest

**<nowiki>#</nowiki>27 (82.1 ng/ul, total = 30 ul) -> XP cut

**<nowiki>#</nowiki>28 (104.4 ng/ul, total = 30 ul) -> XP cut

**<nowiki>#</nowiki>33 32.1 ng/ul <- there is probability that culture volume was not enough ->transfromation

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>3-30-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-11-5-<nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>30-<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>28-<nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5-pSB1K3, <nowiki>#</nowiki>14-5-<nowiki>#</nowiki>3 and Negative control)

*Renilla luciferase assay (with <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5 culture)

*Gel extraction (<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28 XPcut)

*Ligation (0824 retry & <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>27)

*Transformation (Ligation products into WT competent cells & <nowiki>#</nowiki>14-5 miniprep product into WT cell (line-drawing spread), <nowiki>#</nowiki>33 miniprep product into ΔcheZ cell (line-drawing spread))  

*Digest (<nowiki>#</nowiki>14 XPcut)

*Passage(<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5, WT, ΔcheZ, WT in eppen, ΔcheZ in eppen)

*Renilla luciferase assay (with <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5 culture)

*Colony PCR (<nowiki>#</nowiki>33 Miniprep transformations)

*Gel extraction (<nowiki>#</nowiki>14_XP)

*Digest (<nowiki>#</nowiki>5 EXcut, cheZ PCR products XPcut)

*Passage in a shaker(<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5, WT, ΔcheZ)

*Gel extraction (<nowiki>#</nowiki>29_XP, <nowiki>#</nowiki>5_EX)

*Miniprep and frozen stocks (<nowiki>#</nowiki>33, <nowiki>#</nowiki>14-5)

*Digest (<nowiki>#</nowiki>20 SPcut, <nowiki>#</nowiki>14-5 XPcut)

*Waking from frozen stock (WT, ⊿cheZ, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>14-5)

*PCR purification -> digest with XP(<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>14-5)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>20)

*Ligation (higher I/V ratio, into cheZ comp.)(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5(retry), <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5 to pSB1K3 (retry), <nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3, (<nowiki>#</nowiki>33,<nowiki>#</nowiki>34)-<nowiki>#</nowiki>3-17-5)

*Gel extraction -> PCR was failed!(<nowiki>#</nowiki>27,<nowiki>#</nowiki>28)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5 to pSB1K3, <nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3, (<nowiki>#</nowiki>33,<nowiki>#</nowiki>34)-<nowiki>#</nowiki>3-17-5)

*PCR -> check (5uL EP -> PCR clean-up(<nowiki>#</nowiki>27,<nowiki>#</nowiki>28)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>20_SP, pSB1AK3_EP, <nowiki>#</nowiki>3_SP)

*EP for MP check(<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>20)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>29, pSB1AK3-<nowiki>#</nowiki>2-3-11-5 on Amp/Km plate, <nowiki>#</nowiki>3 (Negative control), pSB1AK3 (Negative control) on Amp/Km plate

*Transformation(<nowiki>#</nowiki>2-9 into cheZ-) -> Line-drawing plating

*SOS stress (UV irradiation or H2O2)(<nowiki>#</nowiki>24-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5)

*culture for Miniprep from master plate(<nowiki>#</nowiki>34-3-17-5)

*Waking from frozen stock(<nowiki>#</nowiki>24-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>33-3-11-5)

*Miniprep (<nowiki>#</nowiki>34-3-17-5)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>20_SP, pSB1AK3_EP, <nowiki>#</nowiki>3_SP)

*PCR -> clean-up -> XPcut(<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>3-30)

*Waking from frozen stock(<nowiki>#</nowiki>2-9 (WT), <nowiki>#</nowiki>24-3-17-5)

*Plating from liquid culture(<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>3-17-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>27, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>29, <nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>14-5, <nowiki>#</nowiki>3-30-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>33-<nowiki>#</nowiki>3-17-5 & Negative control)

**Plasmid isolation(<nowiki>#</nowiki>34-3-17-5(MP;1:9gradient))

**Part cloning(<nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>37)

**Titer check(<nowiki>#</nowiki>3-17-5(Takara comp.,1:9gradient), <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5(ΔcheZ comp.0802, 1:9gradient), <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5(ΔcheZ comp.0830, 1:9gradient))

**<nowiki>#</nowiki>34-3-17-5(MP), <nowiki>#</nowiki>3-14, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>37(from Part cloning)

**<nowiki>#</nowiki>27_XP ,<nowiki>#</nowiki>28_XP(0830); <nowiki>#</nowiki>27_XP, <nowiki>#</nowiki>28_XP, <nowiki>#</nowiki>3-30_XP -> failed!, <nowiki>#</nowiki>14-5_XP(0831)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>20)

**<nowiki>#</nowiki>3-14, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>3-14-5 (Recovery from colony PCR tubes!)

**<nowiki>#</nowiki>3 -> Failed (Mixed with DMSO!), <nowiki>#</nowiki>20

**<nowiki>#</nowiki>3-14, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>3-14-5

**<nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>3-17-5

**<nowiki>#</nowiki>36 into Nippon Gene comp.

**Titer check(MP product <nowiki>#</nowiki>3 into 0901 WT comp., MP product <nowiki>#</nowiki>20 into 0901 ΔcheZ comp.)

*Mobility assay(<nowiki>#</nowiki>14-5 (km resistance) WT/ΔcheZ cells)

**<nowiki>#</nowiki>20_SP, <nowiki>#</nowiki>3-14_XP, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-29_XP

*Colony PCR & Master plate(<nowiki>#</nowiki>20-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-27)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>3, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>37, <nowiki>#</nowiki>3-14, <nowiki>#</nowiki>3-29, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-27, ΔcheZ)

**<nowiki>#</nowiki>20-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-27 (Recovery from colony PCR tubes)

**<nowiki>#</nowiki>3-14, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-29 (from miniprep products)

**<nowiki>#</nowiki>20-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-27, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-29 (from miniprep products)

**<nowiki>#</nowiki>3_SP, <nowiki>#</nowiki>20_SP, <nowiki>#</nowiki>37_ES, <nowiki>#</nowiki>3-14_ES, <nowiki>#</nowiki>3-29_ES, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_XP, ΔcheZ_E/P (from MP products)

**<nowiki>#</nowiki>20-3-17-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-27_ES, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-29_ES (from PCR products)

**<nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-<nowiki>#</nowiki>5 into Nippon Gene comp. (+ High Competent Broth 240ul)

**<nowiki>#</nowiki>3-27-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>37-<nowiki>#</nowiki>5 into 0902 WT comp.（+ Takara SOC broth 500ul）

*Part Cloning (<nowiki>#</nowiki>36)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>20-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-5, <nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5)

**<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-29-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>37-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28 into 0901 WT comp.

**<nowiki>#</nowiki>36 into Takara comp.

**<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>5 as Negative Controls into 0901 WT comp.

*Culture for Miniprep(<nowiki>#</nowiki>20-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>20)

*Colony Diffusion Assays (<nowiki>#</nowiki>2-9) WT,cheZ-

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>20)

**Dual Luciferase Assay(<nowiki>#</nowiki>20-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-17-5)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-29-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>37-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>28, <nowiki>#</nowiki>36)

*PCR -> clean-up -> Digest(<nowiki>#</nowiki>3-29-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>37-5)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>20-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>36)

*Culture for Miniprep(<nowiki>#</nowiki>2-3-14-5)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>3-29-5)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>2-3-14-5,　<nowiki>#</nowiki>20-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5)

*PCR (retry) (Hot-start & Normal PCR) -> Purification -> Digest(<nowiki>#</nowiki>3-29-5_XP, <nowiki>#</nowiki>37-5_ES)

**<nowiki>#</nowiki>3-27-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>3-30-<nowiki>#</nowiki>5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5-pSB1AK3

**<nowiki>#</nowiki>5, pSB1AK3 (N.C.)

*Culture for GFP live-imaging (<nowiki>#</nowiki>2-9 WT/cheZ-) -> 4℃ storage

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>3-27-5, <nowiki>#</nowiki>3-30-5)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>36_SP)

*Culture from master plate(<nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-5 (failed))

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>3-29-5_XP, <nowiki>#</nowiki>37-5_ES, pSB1AK3_EP, <nowiki>#</nowiki>36_SP)

*PCR amplification -> Digest(<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-5)

*Digest(<nowiki>#</nowiki>36_SP (re), <nowiki>#</nowiki>2_SP, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_EX, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_ES, <nowiki>#</nowiki>34_SP)

*Culture for Miniprep(<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>3-27-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5)

**<nowiki>#</nowiki>33-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>34-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>36-<nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>2-<nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>1-<nowiki>#</nowiki>3-17-5

**<nowiki>#</nowiki>33, <nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>1, <nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>20, <nowiki>#</nowiki>3, pSB1AK3 (N.C.)

*Frozen stocks(<nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-5)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>33-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>34-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5(psB1AK3))

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>2, <nowiki>#</nowiki>34, <nowiki>#</nowiki>36, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>3-27-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5)

**PCR product: <nowiki>#</nowiki>35_SP, <nowiki>#</nowiki>31_XP, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-27-5_XP, <nowiki>#</nowiki>3-29-5_XP, <nowiki>#</nowiki>37-5_XP

**Miniprep product: <nowiki>#</nowiki>2_SP, <nowiki>#</nowiki>34_SP, <nowiki>#</nowiki>36_SP, <nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_EX, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_ES

*PCR amplification(<nowiki>#</nowiki>34-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-14-5)

*PCR for Sequencing -> Store at -20C(<nowiki>#</nowiki>33-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>34-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5)

*Ligation(<nowiki>#</nowiki>35_ES-psB1AK3_ES, <nowiki>#</nowiki>31_XP-psB1A2_XP, <nowiki>#</nowiki>31_XP-psB1AK3_XP, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5_ES-<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_EX, <nowiki>#</nowiki>20-<nowiki>#</nowiki>3-27-5)

*Culture for Miniprep(<nowiki>#</nowiki>34-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5)

**PCR products: <nowiki>#</nowiki>34-3-14-5_ES, <nowiki>#</nowiki>36-3-14-5_ES, <nowiki>#</nowiki>20-3-14-5_ES

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>35-pSB1AK3 (failed), <nowiki>#</nowiki>31-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-<nowiki>#</nowiki>37-5, <nowiki>#</nowiki>36-<nowiki>#</nowiki>3-29-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5-<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-27-5(failed))

**From Miniprep : <nowiki>#</nowiki>3-14-5, <nowiki>#</nowiki>3-17-5

**From Colony PCR : <nowiki>#</nowiki>31, <nowiki>#</nowiki>3-37-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5-2-3-17-5 (failed)

**Miniprep product: <nowiki>#</nowiki>3-11-5_EP

**PCR-purified product: <nowiki>#</nowiki>3-14-5_EP, <nowiki>#</nowiki>3-17-5_EP, <nowiki>#</nowiki>31_EP, <nowiki>#</nowiki>3-37-5_XP, <nowiki>#</nowiki>36-3-29-5_ES

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>34-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>2-3-11-5 (pSB1AK3))

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>34-3-14-5_ES, <nowiki>#</nowiki>36-3-14-5_ES, <nowiki>#</nowiki>20-3-14-5_ES, <nowiki>#</nowiki>3-11-5_EP)

**<nowiki>#</nowiki>3-11-5_EP-pSB1C3_EP, <nowiki>#</nowiki>29_XP-pSB1AK3_XP

**<nowiki>#</nowiki>36-3-14-5_ES-<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5_EX, <nowiki>#</nowiki>20_SP-<nowiki>#</nowiki>3-27-5_XP(retry)

**<nowiki>#</nowiki>2-3-11-5 (pSB1AK3) into 0908 WT comp.

**<nowiki>#</nowiki>20-3-29-5 into 0909 WT comp.

**<nowiki>#</nowiki>20-3-29-5 into 0802 cheZ- comp.

*Culture for Miniprep(<nowiki>#</nowiki>31-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-37-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5-2-3-17-5)

*UV irradiation -> Luciferase Assay(<nowiki>#</nowiki>24-3-17-5, <nowiki>#</nowiki>34-3-17-5)

*CleanSEQ -> Sequencing(<nowiki>#</nowiki>33-3-11-5, <nowiki>#</nowiki>34-3-14-5, <nowiki>#</nowiki>20-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>37-5)

*Miniprep(<nowiki>#</nowiki>31-pSB1AK3, <nowiki>#</nowiki>3-37-5, <nowiki>#</nowiki>36-3-29-5, <nowiki>#</nowiki>3-14-5-2-3-17-5)

*Gel extraction(<nowiki>#</nowiki>3-14-5_EP, <nowiki>#</nowiki>3-17-5_EP, <nowiki>#</nowiki>31_EP, <nowiki>#</nowiki>3-37-5_XP, <nowiki>#</nowiki>36-3-29-5_ES)

*Colony PCR(<nowiki>#</nowiki>36-3-14-5-<nowiki>#</nowiki>2-3-17-5 (Maybe Ligation was FAILURE , estimated length is 1000-1500 by electrophoresis))