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Team:KIT-Kyoto/Notebook/LabNote/GFPMLF8J
From 2011.igem.org
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::<span style="FONT-FAMILY: 'ArialMT','sans-serif'; mso-hansi-font-family: ArialMT; mso-bidi-font-family: 'Times New Roman'" lang="EN-US"> F: 3' TT<span style="COLOR: red">GAATTC</span>TT<span style="COLOR: red">TCTAGA</span>TTCGTAAAGGAGAAGAA<br> | ::<span style="FONT-FAMILY: 'ArialMT','sans-serif'; mso-hansi-font-family: ArialMT; mso-bidi-font-family: 'Times New Roman'" lang="EN-US"> F: 3' TT<span style="COLOR: red">GAATTC</span>TT<span style="COLOR: red">TCTAGA</span>TTCGTAAAGGAGAAGAA<br> | ||
<em>Eco</em>RⅠ <em>Xba</em>Ⅰ<br> | <em>Eco</em>RⅠ <em>Xba</em>Ⅰ<br> | ||
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<em>Pst</em>Ⅰ <em>Spe</em>Ⅰ<br> | <em>Pst</em>Ⅰ <em>Spe</em>Ⅰ<br> | ||
::Tm値:67.66゜C 36塩基 | ::Tm値:67.66゜C 36塩基 | ||
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<b>Purpose</b> | <b>Purpose</b> | ||
| + | :BBa_E0240のアルカリミニプレップ | ||
| + | :BBa_E0240の電気泳動 | ||
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| + | :BBa_E0240のアルカリミニプレップをした後、下表に従って、30分37℃で制限酵素処理を行った。 | ||
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| + | :<table border=1 width="220px"> | ||
| + | :<tr><td width="130px" align=center>ddH<sub>2</sub>O</td><td width="90px" align=right>2 µl</td></tr> | ||
| + | :<tr><td align=center>BBa_E0240</td><td align=right>50 µl</td></tr> | ||
| + | :<tr><td align=center><em>Eco</em>RⅠ</td><td align=right>1 µl</td></tr> | ||
| + | :<tr><td align=center><em>Pst</em>Ⅰ</td><td align=right>1 µl</td></tr> | ||
| + | :<tr><td align=center>10 x H Buffer</td><td align=right>6 µl</td></tr> | ||
| + | :<tr><td align=center> </td><td align=right>total 60 µl</td></tr> | ||
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| + | :制限酵素処理後、100 V 30minで電気泳動した。 | ||
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| + | <b>Results</b> | ||
| + | :泳動後の写真<BR> | ||
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| + | :800bpあたりにバンドが出ていた。 | ||
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Revision as of 08:07, 3 October 2011
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| Home | Team | Project | Parts | Notebook | Safety | Human Practice | Attributions |
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| Home > Notebook > Lab Note > August | Language：English/Japanese |
|---|
８月２２日
Member
- 吉村、中川、松浪
Purpose
- BBa_E0240のトランスフォーメーション
Results
- コロニーの生育がみられた。
８月２３日
Member
- 吉村、中川
Purpose
- 1.BBa_E0240のプレカルチャー
- 2.BBa_E0240からATG GFPを作るためのプライマー設計
Results
- 1.全てのサンプルに大腸菌の増殖がみられた。
- 2.以下のように設計した。
- F: 3' TTGAATTCTTTCTAGATTCGTAAAGGAGAAGAA
- F: 3' TTGAATTCTTTCTAGATTCGTAAAGGAGAAGAA
EcoRⅠ XbaⅠ
- Tm値:67.75゜C 33塩基
- Tm値:67.75゜C 33塩基
- R: 5' AAACTGCAGAAAACTAGTTTTTTATTATTTGTATAG
- R: 5' AAACTGCAGAAAACTAGTTTTTTATTATTTGTATAG
PstⅠ SpeⅠ
- Tm値:67.66゜C 36塩基
８月２４日
Member
吉村、中川
Purpose
- BBa_E0240のアルカリミニプレップ
- BBa_E0240の電気泳動
Method
- BBa_E0240のアルカリミニプレップをした後、下表に従って、30分37℃で制限酵素処理を行った。
ddH2O 2 µl BBa_E0240 50 µl EcoRⅠ 1 µl PstⅠ 1 µl 10 x H Buffer 6 µl total 60 µl
- 制限酵素処理後、100 V 30minで電気泳動した。
Results
- 泳動後の写真
-
- 800bpあたりにバンドが出ていた。
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