Team:KIT-Kyoto/nakagawa

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iGEMからのGFPを増やすために大腸菌に形質転換する(トランスフォーメーション)
iGEMからのGFPを増やすために大腸菌に形質転換する(トランスフォーメーション)
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↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍する<BR>
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↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注する<BR>
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↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した<BR>
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↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻す<BR>
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↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻した<BR>
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↓DNAをチューブに1~5 µl加えて、氷上で30分間冷やす<BR>
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↓DNAをチューブに1~5 µl加えて、氷上で30分間冷やした<BR>
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↓42°Cで45秒間熱ショックを与える<BR>
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↓37°Cで1時間、振りながら回復培養する<BR>
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↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまく<BR>
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↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまいた<BR>
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↓37°Cで一晩培養する<BR>
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(結果)
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Revision as of 13:39, 18 September 2011

8/22
(目的)
iGEMからのGFPを増やすために大腸菌に形質転換する(トランスフォーメーション)

(方法)

トランスフォーメーション


↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍した
↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した
↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻した
↓DNAをチューブに1~5 µl加えて、氷上で30分間冷やした
↓42°Cで45秒間熱ショックを与えた
↓0.9 mlのSOC培地を加えた
↓37°Cで1時間、振りながら回復培養した
↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまいた
↓37°Cで一晩培養した


(結果)