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-	<font color="#ec6d71">去年のコピペばーじょん☆</font>
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-	<font color="#89c3eb">今年のシエロさんにもろたプリント☆</font>	+	</body>
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-	↓ligation後の反応液を全量、コンピテント細胞(大腸菌)へ加える<BR>	+
-	↓氷上で15分間冷やす<BR>	+
-	↓43°Cで30秒間熱ショクを与える<BR>	+
-	↓氷上で10分間冷やす<BR>	+
-	↓SOCまたはLB(-)溶液を等量加えて、37°C(API2-MALT1は30°C)で30分間回復培養する<BR>	+
-	↓LB(+amp)プレートに塗る<BR>	+
-	↓37°C(API2-MALT1は30°C)で培養する</body>	+
	</html>		</html>

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Revision as of 13:37, 18 September 2011

8/22
（目的）
iGEMからのGFPを増やすために大腸菌に形質転換する（トランスフォーメーション）

方法

トランスフォーメーション

↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍する
↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注する
↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻す
↓DNAをチューブに1～5 µl加えて、氷上で30分間冷やす
↓42°Cで45秒間熱ショックを与える
↓0.9 mlのSOC培地を加える
↓37°Cで1時間、振りながら回復培養する
↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまく
↓37°Cで一晩培養する