Team:UTP-Panama/Project

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RenboProject.jpg


UTP-PANAMÁ TEAM 2011


Universidad Tecnológica de Panamá



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Contents

THERMOGENIC RESPONSE NUTRIENT BIOSENSOR (THE RENBO)


INTRODUCTION

En la ingeniería se necesitan de sensores robustos y que puedan funcionar bajo diferentes condiciones y rangos. En pasadas ediciones de iGEM se han dado intentos por lograr que cada vez más los microorganismos (as machines & sensors) resistan y funcionen antes divesas condiciones de estres.

El UTP-Panama en su visión de desarrollar herramientas ingenieriles a partir de biotecnología, se preocupo por mejorar y crear sensores más robustos a las condiciones ambientales y climáticas.

En este sentido uno de los mayores retos esta en la capacidad de los microorganismos de seguir trabajando bajo cambios de temperatura, ya que pierden capacidad a bajas temperaturas (D’amico, et al. 2006). Este problema ha sido atacado por diversos equipo como el UNAM-Cinvestav 2010, utilizando el CspA promoter como un mejor promotor para bajas temperaturas en combinación con la proteina anticongelante (AFP) [1]. Nosotros el UTP-Panamá Team busca extender el rango de sensores a partir de la utilización de la AOX enzyme (Alternative oxidase), la cual principalmente ha sido diseñada para responder a Cold-shock, elevando la temperatura. A continuación explicamos porque. El biosensor escogido para las mejoras es el Nitrate Biosensor (PyeaR - GFP composite) developed by Team BCCS-Bristol 2010, el cual es un sensor para medir los niveles de Nitrogeno (nutrientes) en el suelo, parametro muy importante para la actividad agricola

Project Description

The original Biobricks para sensar los niveles de Nitratos en el suelo desarrollado por Bristol iGEM Team 2010[2], estaba diseñado para funcionar a temperaturas ambientes, en especial para 37°C, utilizando el Biobricks PyeaR promoter[3]. Nosotros el UTP-Panama iGEM team buscamos extender el rango de funcionamiento optimo del sensor desarrollado por Bristol a temperaturas por debajo de los 20°C, ya que muchos de los cultivos en Tierras altas (cafe y frutas), se encuentran en este rango. Para resolver este problemas encontramos que la utilización del AOX enzyme (Alternative oxidase), gene responsible for thermogenesis in the sacred lotus[4], principalmente utilizada en Synthetic Biology para generar un aumento en la temperatura periplasmatica, producia un interesante aumento en el crecimiento y densidasd bacteriana con la dismunición de la temperatura (picture 1 & 2)

Picture 1 (source Gatech iGEM Team 2010) Growth at 37.jpg Picture 2 (source Gatech iGEM Team 2010) Bacterial growth 15°C.jpg




To develop flexible and better sensors for environmental, agricultural and engineering applications are the aims of the UTP-Panama Team “SynBio Engineering Tool Kit”. In this way we work with Nitrate Biosensor (PyeaR - GFP composite) developed by Team BCCS-Bristol 2010, which expresses fluorescent signals upon nutrient detection, producing a high-resolution map of arable land. To achieve this goal we use the collateral effect of the AOX enzyme (Alternative oxidase) mainly designed to generate heat in response to a cold-shock, using the hybB promoter. This effect increases the bacteria growth at temperatures below 20°C. Finally we design a prototype device with a better cold shock promoter (CspA promoter) developed by UNAM-CINVESTAV Team in 2010, in order to give our E. coli a “Intelligent Coat", which means that not to only survive a cold-shock but to also still been able to keep up with his duties due to improve their expression mechanism at low temperature.

BBa_K410000


The original BrainStorms ideas

To see the Original Project Description June-July 2011 click here.

REFERENCES

[1]https://2010.igem.org/Team:Mexico-UNAM-CINVESTAV/Project/Our_project [2]http://partsregistry.org/Part:BBa_K216005

Our Project Details

Part 2

The Experiments

Part 3

Results

REFERENCES

[1]https://2010.igem.org/Team:Mexico-UNAM-CINVESTAV/Project/Our_project [2]http://partsregistry.org/Part:BBa_K381001 [3]http://partsregistry.org/Part:BBa_K216005

[4]Grant, N et al. “Two Cys or Not Two Cys? That is the Question; Alternative Oxidase in the Thermogenic Plant sacred Lotus.” Plant Physiology 150 (2009): 987-995.