Thursday, July7

From 2011.igem.org

(Difference between revisions)
(Created page with "PCR recipe Date: 7/7 Control A Control B Rx1 A Rx1 B Rx2 A Rx2 B Rx3 A Rx3 B Rx4 A Rx4 B Rx5 A Rx5 B Polymerase (pfu Ultra) 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 10X b...")
 
Line 9: Line 9:
B
B
Polymerase (pfu Ultra) 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul
Polymerase (pfu Ultra) 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul
 +
10X buffer                 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul
10X buffer                 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul
 +
Forward primer (100ng/ul)1.25ul 1.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul
Forward primer (100ng/ul)1.25ul 1.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul
 +
Reverse primer (100ng/ul)1.25ul 1.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul
Reverse primer (100ng/ul)1.25ul 1.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul
 +
Plasmid                    2ul 2ul 0.5ul 0.5ul 1ul 1ul 5ul 5ul 10ul 10ul 15ul 15ul
Plasmid                    2ul 2ul 0.5ul 0.5ul 1ul 1ul 5ul 5ul 10ul 10ul 15ul 15ul
 +
dNTPs                         1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul
dNTPs                         1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul
 +
Nuclease free water  34.5ul 34.5ul 26ul 26ul 25.5ul 25.5ul 21.5ul 21.5ul 16.5ul 16.5ul 11.5ul 11.5ul
Nuclease free water  34.5ul 34.5ul 26ul 26ul 25.5ul 25.5ul 21.5ul 21.5ul 16.5ul 16.5ul 11.5ul 11.5ul
 +
  this it the recipe for the pcr reaction of mutagenesis we did on july 7 thursday.
  this it the recipe for the pcr reaction of mutagenesis we did on july 7 thursday.
 +
 +
  Cylcle                    temperature        time
  Cylcle                    temperature        time
 +
Initial warmup          95 degrees        2 mins
Initial warmup          95 degrees        2 mins
 +
Denaturation            95 degrees        30 sec
Denaturation            95 degrees        30 sec
 +
annealing                  61.8 degrees    30 sec
annealing                  61.8 degrees    30 sec
 +
extension                  72 degrees        5min
extension                  72 degrees        5min
 +
final extension          72 degrees        10 min
final extension          72 degrees        10 min
 +
store                            4 degrees          infinitive
store                            4 degrees          infinitive
 +
Bivor
Bivor

Latest revision as of 01:26, 1 August 2011

PCR recipe Date: 7/7 Control A Control B Rx1 A Rx1 B Rx2 A Rx2 B Rx3 A Rx3 B Rx4 A Rx4 B Rx5 A Rx5 B Polymerase (pfu Ultra) 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul

10X buffer 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul 5ul

Forward primer (100ng/ul)1.25ul 1.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul

Reverse primer (100ng/ul)1.25ul 1.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul 6.25ul

Plasmid 2ul 2ul 0.5ul 0.5ul 1ul 1ul 5ul 5ul 10ul 10ul 15ul 15ul

dNTPs 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul 1ul

Nuclease free water 34.5ul 34.5ul 26ul 26ul 25.5ul 25.5ul 21.5ul 21.5ul 16.5ul 16.5ul 11.5ul 11.5ul

this it the recipe for the pcr reaction of mutagenesis we did on july 7 thursday.


Cylcle                    temperature         time

Initial warmup 95 degrees 2 mins

Denaturation 95 degrees 30 sec

annealing 61.8 degrees 30 sec

extension 72 degrees 5min

final extension 72 degrees 10 min

store 4 degrees infinitive


Bivor