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Team:KIT-Kyoto/nakagawa
From 2011.igem.org
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↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍した<BR> | ↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍した<BR> | ||
↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した<BR> | ↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した<BR> | ||
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Revision as of 13:45, 18 September 2011
（目的）
iGEMからのGFPを増やすために大腸菌に形質転換する（トランスフォーメーション）
（方法）
トランスフォーメーション
↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍した
↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した
↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻した
↓DNAをチューブに1～5 µl加えて、氷上で30分間冷やした
↓42°Cで45秒間熱ショックを与えた
↓0.9 mlのSOC培地を加えた
↓37°Cで1時間、振りながら回復培養した
↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまいた
↓37°Cで一晩培養した
（結果） 翌日コロニーの生育を確認することができた
