Team:KIT-Kyoto/nakagawa
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- | ↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株) | + | ↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍した<BR> |
- | ↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 | + | ↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した<BR> |
- | ↓余ったコンピテント細胞は- | + | ↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻した<BR> |
- | ↓DNAをチューブに1~5 | + | ↓DNAをチューブに1~5 µl加えて、氷上で30分間冷やした<BR> |
- | + | ↓42°Cで45秒間熱ショックを与えた<BR> | |
- | ↓0.9 | + | ↓0.9 mlのSOC培地を加えた<BR> |
- | + | ↓37°Cで1時間、振りながら回復培養した<BR> | |
- | ↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか) | + | ↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまいた<BR> |
- | + | ↓37°Cで一晩培養した<BR> | |
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Revision as of 13:39, 18 September 2011
(目的)
iGEMからのGFPを増やすために大腸菌に形質転換する(トランスフォーメーション)
(方法)
トランスフォーメーション
↓氷上でコンピテント細胞(DH5 Alpha:大腸菌株)を解凍した
↓前もって冷やしておいた1.5 mlチューブに100 µlのコンピテント細胞を分注した
↓余ったコンピテント細胞は-80°Cの冷凍庫に戻した
↓DNAをチューブに1~5 µl加えて、氷上で30分間冷やした
↓42°Cで45秒間熱ショックを与えた
↓0.9 mlのSOC培地を加えた
↓37°Cで1時間、振りながら回復培養した
↓1 mlをLBプレート(+amp,+kan,+camのいずれか)にまいた
↓37°Cで一晩培養した
(結果)